說到混合型液相色譜柱,它是一種能夠發生多種相互作用模式的色譜柱,作為色譜分離的核心,在目前的液相色譜分析中發揮著重要的作用。混合模式的色譜柱也是種類繁多,有雙重混合模式的,也有三重混合模式的。雙重混合模式包括:反相+陽離子交換,反相+陰離子交換,反相+HILIC等。三重混合模式包括:反相+陽離子交換+陰離子交換,HILIC+陽離子交換+陰離子交換等。
混合模式色譜柱由于其多種優點,實驗人員在分離復雜樣品時,越來越多的被使用到實驗中,賽默飛擁有的三重混合模式Trinity系列色譜柱在單次運行中可同時分離離子和疏水性分析物,消除了更換色譜柱,使用離子對或使用多種色譜填料的需要。
來來來
我們來隆重介紹一下Acclaim Trinity系列色譜柱。Acclaim Trinity系列均為三重混合模式的色譜柱。又分為P和Q兩個系列,均采用納米微球-硅膠雜化技術,一個顆粒上集成了三種分離模式。P系列色譜柱可以同時分離陽離子、陰離子和非極性化合物。Q系列先賣個關子~
圖1. 納米微球-硅膠雜化技術
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新型Nanopolymer Silica Hybrid(NSH)技術在對以下物質分離時可以獲得*的色譜性能:
01 | 原料藥和反離子 |
02 | 藥物反離子的篩選 |
03 | 酸性和堿性原料藥及各自反離子的混合物 |
04 | 酸性、堿性和中性原料藥的混合物 |
圖2. Trinity P1柱和Trinity P2柱對比
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使用與維護
當次使用新的色譜柱時,在進行任何進樣之前,應采用流動相進行*沖洗(例如,在推薦的流速,大約使用 20 柱體積)。
當切換到新的流動相時, 確保新的流動相與色譜柱中以前的流動相相容,以避免由于沉淀造成色譜柱堵塞。在進行任何進樣(例如 20 個柱體積)之前,應*調節色譜柱。
使用色譜柱前,需要把系統里置換為含有鹽的水相和有機相。保證色譜柱一直在帶有緩沖鹽的體系下使用,是對色譜柱較好的維護。
色譜柱清洗
對于磷酸鹽緩沖液中使用的 3.0 mm 內徑色譜柱:
1
在 0.3 mL/min 流速時,使用 5 個柱體積的 20 mM 磷酸鈉(或鉀)緩沖液, pH 值 6 / 乙腈 v/v 50/50 清洗色譜柱。
2
在 0.3 mL/min 流速時,使用 20 個柱體積的 100 mM 磷酸鈉(或鉀)緩沖液, pH 值 6 / 乙腈 v/v 90/10 清洗色譜柱(以強力清除滯留的離子物)。
3
在 0.3 mL/min 流速時,使用 5 個柱體積的 10 mM 磷酸鈉(或鉀)緩沖液, pH 值 6 / 乙腈 v/v 50/50 清洗色譜柱。
4
在 0.3 mL/min 流速時,使用 20 個柱體積的 10 mM 磷酸鈉(或鉀)緩沖液, pH 值 6.4 / 乙腈 v/v 20/80 清洗色譜柱(以強力清除滯留的疏水污染物)。
5
使用至少 20 個柱體積流動相平衡色譜柱。
典型應用
圖3. Trinity P1柱分析氯酸鹽和高氯酸鹽
圖4.Trinity P1同時分離藥物反離子
圖5.Trinity P2柱分析藥物相關陰離子和陽離子
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